Electroforese: para que serve, para que serve e como se fai

Contido

• Para que serve
• Como se fai
• Tipos de electroforese
• 1. Electroforese da hemoglobina
• 2. Electroforese proteica

A electroforese é unha técnica de laboratorio realizada co obxectivo de separar as moléculas segundo o seu tamaño e carga eléctrica de xeito que se poida diagnosticar enfermidades, verificar a expresión de proteínas ou identificar microorganismos.

A electroforese é un procedemento sinxelo e de baixo custo, que se usa en rutinas de laboratorio e en proxectos de investigación. Segundo o propósito da electroforese, pode ser necesario realizar outras probas e exames para chegar a un diagnóstico, por exemplo.

Para que serve

A electroforese pódese realizar con varios propósitos, tanto en proxectos de investigación como en diagnóstico, xa que é unha técnica sinxela e de baixo custo.Así, a electroforese pódese realizar para:

• Identificar virus, fungos, bacterias e parasitos, sendo esta aplicación máis común en proxectos de investigación;
• Proba de paternidade;
• Comprobe a expresión das proteínas;
• Identificar mutacións, sendo útil no diagnóstico de leucemias, por exemplo;
• Analizar os tipos de hemoglobina circulante, sendo útil no diagnóstico da anemia falciforme;
• Avaliar a cantidade de proteínas presentes no sangue.

Segundo o propósito da electroforese, pode ser necesario realizar outras probas complementarias para que o médico complete o diagnóstico.

Como se fai

Para facer a electroforese é necesario o xel, que pode ser de poliacrilamida ou agarosa segundo o obxectivo, tampón de electroforese e cuba, marcador de peso molecular e un colorante fluorescente, ademais dun equipo de luz UV ou LED, tamén coñecido como transiluminador .

Despois de preparar o xel, hai que colocar un obxecto específico para facer os pozos no xel, popularmente chamado pente, e deixar que o xel se poña. Cando o xel estea listo, só tes que aplicar as substancias aos pozos. Para iso, hai que colocar un marcador de peso molecular nun dos pozos, un control positivo, que é a substancia que se sabe o que é, un control negativo, que garante a validez da reacción e as mostras a analizar. Todas as mostras deben mesturarse cun colorante fluorescente, xa que deste xeito é posible visualizar as bandas do transiluminador.

O xel coas mostras debe colocarse na cuba de electroforese, que contén a solución tampón específica, e despois acéndese o dispositivo para que haxa corrente eléctrica e, en consecuencia, diferenza de potencial, o que é importante para a separación das partículas segundo á súa carga e tamaño. O tempo de funcionamento electroforético varía segundo o propósito do procedemento e pode durar ata 1 hora.

Despois do tempo determinado, é posible ver o resultado do percorrido electroforético a través do transiluminador. Cando o xel se coloca baixo luz ultravioleta ou LED, é posible ver o patrón de bandas: canto maior é a molécula, menos migra, achegándose ao pozo, mentres canto máis lixeira é a molécula, maior é o potencial migratorio.

Para que a reacción se valide, é necesario que se visualicen as bandas do control positivo e que no control negativo non se visualice nada, porque senón é unha indicación de que houbo contaminación e hai que repetir todo o proceso.

Tipos de electroforese

A electroforese pódese realizar con diferentes fins e, segundo o seu propósito, pódense empregar varios tipos de xel, sendo o máis común a poliacrilamida e a agarosa.

A electroforese para identificar microorganismos é máis común que se realice en laboratorios de investigación, con todo, con fins diagnósticos, a electroforese pode usarse para identificar enfermidades hematolóxicas e enfermidades que evolucionan co aumento da cantidade de proteínas, sendo os principais tipos de electroforese:

1. Electroforese da hemoglobina

A electroforese da hemoglobina é unha técnica de laboratorio realizada para identificar os diferentes tipos de hemoglobina que circulan polo sangue, o que permite identificar a presenza de enfermidades relacionadas coa síntese de hemoglobina. O tipo de hemoglobina identifícase mediante electroforese cun pH específico, idealmente entre 8,0 e 9,0, verificándose un patrón de bandas que se pode comparar co patrón normal, permitindo a identificación da presenza de hemoglobinas anormais.

Para que está feito: A electroforese da hemoglobina realízase para investigar e diagnosticar enfermidades relacionadas coa síntese de hemoglobina, como a anemia falciforme e a enfermidade da hemoglobina C, ademais de ser útil para diferenciar a talasemia. Aprende a interpretar a electroforese da hemoglobina.

2. Electroforese proteica

A electroforese proteica é un exame solicitado polo médico para avaliar a cantidade de proteínas que circulan polo sangue e, así, identificar enfermidades. Esta proba faise a partir dunha mostra de sangue, que se centrifuga para obter o plasma, que parte do sangue, composta, entre outras substancias, por proteínas.

Despois da electroforese, pódese visualizar un patrón de bandas e, posteriormente, un gráfico no que se indica a cantidade de cada fracción de proteínas, sendo fundamental para o diagnóstico.

Para que está feito: A electroforese proteica permite ao médico investigar a aparición de mieloma múltiple, deshidratación, cirrose, inflamación, enfermidades hepáticas, pancreatite, lupus e hipertensión segundo o patrón de banda e o gráfico presentado no informe do exame.

Comprender como se fai e como comprender o resultado da electroforese proteica.