Mancha de Gram: como se elabora e para que serve

Contido

• Como se fai a tinción de Gram
• Para que serve

A tinción de Gram, ou simplemente Gram, é unha técnica rápida e sinxela que ten como obxectivo diferenciar as bacterias segundo as características da súa parede celular despois da exposición a diferentes colorantes e solucións.

Así, mediante a tinción de Gram, é posible verificar, ademais da forma das bacterias, a cor que adquiren, e este resultado é importante para definir outras estratexias de identificación das especies bacterianas e para que o médico indique un tratamento preventivo. segundo as características observadas microscópicamente.

A tinción de Gram adóitase facer rutineiramente no laboratorio e forma parte do exame de bacterioscopia. Comprender que é e como se fai a bacterioscopia.

Como se fai a tinción de Gram

A tinción de Gram é un método rápido, práctico e barato para identificar as bacterias responsables de infeccións, sendo útil para os médicos para indicar un tratamento preventivo da infección que poida ocorrer, xa que se coñecen características específicas destes grupos de bacterias,

A tinción de Gram faise en 7 pasos principais, pero o protocolo pode variar dependendo do laboratorio:

1. Coloca algunhas colonias da bacteria no portaobxectos, engadindo unha gota de auga para facilitar a homoxeneización das colonias;
2. Déixeo secar un pouco e a folla pode pasar rapidamente pola chama para favorecer o secado, pero é importante prestar atención á temperatura, xa que se a temperatura é demasiado alta é posible que haxa un cambio na estrutura do bacterias, que poden interferir co resultado do exame;
3. Cando o portaobxectos estea seco, cóbrese co colorante de cristal violeta e déixeo actuar durante aproximadamente 1 minuto;
4. Lave a lámina cun chorro de auga corrente e cóbrela co lugol, que ten como obxectivo fixar o colorante azul e déixeo actuar durante 1 minuto. Os dous tipos de bacterias son capaces de absorber o complexo formado polo colorante e o lugol, volvéndose azul;
5. A continuación, lave a diapositiva con auga corrente e aplique o 95% de alcol, deixándoo actuar durante 30 segundos. O alcohol é o responsable de disolver a membrana lipídica que forma bacterias gramnegativas e, polo tanto, eliminar o complexo formado entre o colorante e o lugol, decolorando estas bacterias. Non obstante, no caso das bacterias gram-positivas, o alcohol deshidrata a parede celular das bacterias gram-positivas, provocando a contracción dos poros e facéndoos impermeables;
6. Despois, debe lavarse de novo baixo auga corrente e cubrir o portaobxectos co segundo colorante, fucsina ou safranina e deixalo actuar durante 30 segundos;
7. A continuación, lave a diapositiva baixo auga corrente e déixea secar a temperatura ambiente.

Unha vez seca a lámina, é posible colocar unha pinga de aceite de inmersión e observala ao microscopio cun obxectivo 100x, sendo posible comprobar a presenza ou ausencia de bacterias, así como a presenza de lévedos e células epiteliais.

Para que serve

A tinguidura de Gram ten como principal obxectivo diferenciar as bacterias segundo as características da parede celular e a morfoloxía xeral. Así, segundo as características observadas ao microscopio, as bacterias pódense clasificar en:

• Bacterias gram-positivas, que se visualizan cunha cor azul debido a que non están descoloridas polo alcol, xa que teñen unha parede celular máis grosa e os seus poros constrúense cando están expostos ao lugol;
• Bacterias gramnegativas, que se visualizan cunha cor rosa / púrpura debido a que están decoloradas polo alcol e manchadas por safranina ou fucsina.

Despois de visualizar as bacterias ao microscopio, é posible que se realicen outras probas no laboratorio para identificar as especies da bacteria. Non obstante, a través do Gram e da asociación con signos e síntomas presentados pola persoa, o médico pode indicar un tratamento preventivo ata que se dispoña do resultado de exames máis específicos, xa que deste xeito é posible diminuír a taxa de replicación bacteriana e evitar complicacións.